| 细胞别称 |
MDAMB231细胞;MDA MB 231细胞 |
| 细胞来源 |
人乳腺 |
| 细胞形态 |
上皮细胞样 |
| 细胞类型 |
肿瘤细胞 |
| 生长特性 |
贴壁细胞 |
| 安全等级 |
BSL1 |
| 包装规格 |
T25瓶或者1mL冻存管包装 |
| 倍增时间 |
2~3天 |
| 传代比例 |
1:2-1:4(具体情况视细胞生长速度及密度决定) |
| 保藏机构 |
ATGG |
【培养保存】
培养体系:DMEM+10% FBS+1% P/S
培养条件:气相 ;空气,95% CO25% 温度:37℃
冻存条件:基础培养基+10%DMSO+20%FBS,液氮保存
注意:此细胞需要每天换液
【传代步骤】
当细胞密度达80%-90%,即可进行传代培养。
1.弃去培养上清,用不含钙、镁离子的PBS润洗细胞1-2次;
2.加1ml消化液于培养瓶中,置于37℃培养箱中消化2-4分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养瓶后加胰酶3倍体积的培养基终止消化;
3.用巴氏管轻轻打匀后吸出,在1000RPM条件下离心5分钟,弃去上清液,加入培养液后吹匀;
4.收到细胞后首次传代推荐将细胞悬液按1:2的比例分到新的含6ml培养基的新皿中或者瓶中,建议冻存一支备用,后续传代根据实际情况按1:2到1:4的比例进行。
【冻存步骤】
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS清洗一遍后加入1ml胰酶,细胞变圆脱落后,加入3ml含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数;
2. 5min 1000rpm 离心去掉上清。加1ml血清重悬细胞,根据细胞数量加入血清和DMSO,轻轻混匀,DMSO终浓度为10%,细胞密度不低于1x10(6)/ml,每支冻存管冻存1ml细胞悬液,注意冻存管做好标识;
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80度冰箱,至少2个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。