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Genecarer RT SuperMix with dsDNase

货号:GC231000554

规格:50rnx;100rnx;

价格:¥450.00;900.00;

产品用途:反转录

产品描述

        Genecarer RT SuperMix with dsDNase是将RNA逆转录成为cDNA更为简便的操作系统,含有第一链cDNA合成所需的所有试剂,只需加入RNA模板和水即可进行逆转录反应。合成的第一链cDNA可广泛用于文库构建、第二链合成、杂交、PCR扩增、RT-qPCR检测等。试剂盒中包含新一代的逆转录酶和优化的缓冲液,与普通逆转录酶系统相比,具有逆转录能力强(合成较多全长cDNA、无RNase    H活性、热稳定性高和半衰期长等优点。该逆转录酶产物得率更高,获得的cDNA片段更长,模板使用范围更广等特点。5×Reaction Mix包含逆转录反应所需的缓冲液,dNTPs及优化的逆转录引物,Supreme Enzyme Mix包含ExonScript Reverse TranscriptaseRibonuclease InhibitordsDNase,以简化加样步骤。试剂盒中含有的新型dsDNase,能够特异性去除双链DNA,而不消化RNA样品、逆转录引物及合成的cDNA,并且具   有热敏感性,可在55℃快速不可逆失活,实现去除基因组污染与逆转录反应的同步进行。


【产品特点】

  • 1.高热稳定性,反应温度42-55℃,有助于RNA二级结构打开;

  • 2.逆转录能力强、cDNA合成得率高,片段更长;

  • 3.无RNase  H活性,避免第一链cDNA合成过程中DNA/RNA杂交体中模板RNA被降解,从而保证第一链cDNA合成量和长度;

  • 4.去除基因组DNA,保证定量结果更加准确;

  • 5.操作简便,仅需加入RNA模板和水即可进行逆转录反应合成片段15 kb。
     

【适用范围】
cDNA合成及文库构建PCR扩增、RT-qPCR检测

【产品组成】
 

Component

GC231000554-1

GC231000554-2

5×Reaction Mix*1

200 μl

400 μl

Supreme Enzyme Mix*2

150 μl

300 μl

DEPC-treated Water

1 ml

2×1 ml


*1:  包含BufferdNTPsRandom Hexamer Primer/Oligo (dT)20  Primer Mix
*2: 包含ExonScript Reverse TranscriptaseRibonuclease InhibitordsDNase
 

  【第一链cDNA合成】
 
 

  1. RNase-free离心管中配制如下混合液,轻轻混匀并瞬离以下成分:

Component

Volume

10 pg-5 μg Total RNA or 10 pg-500 ng mRNA*3

As Required

DEPC-treated Water

up to 13 μl

5×Reaction Mix*4

4 μl

Supreme Enzyme Mix

3 μl

*1: 为保证逆转录成功,请使用高质量RNA模板。
*2: 5×Reaction Mix在使用前需充分混匀。

  1. 按照下表所示进行逆转录反应:

Temperature

Time

Note

25

10 min

随机引物与RNA模板配对及去除基因组DNA

55

15 min

逆转录反应及dsDNase快速灭活

85

5 min

逆转录酶灭活

  1. 产物可立即用于PCRqPCR反应,或在-20℃保存,并在半年内使用;长期存放建议分装后在-70℃保存。cDNA应避免反复冻融。
     

【注意事项】
防止RNase污染请保持实验区域洁净;操作时需穿戴干净的手套、口罩;实验所用的离心管、枪头等耗材均需  保证RNase-free

 
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