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GC-Plenti-SFFV-CHRNA7（human)-3xFlag-P2A-Puro
过表达慢病毒产品信息
| 产品名称 | GC-Plenti-SFFV-CHRNA7（human)-3xFlag-P2A-Puro | ||
| 基因名称 | CHRNA7 | 物种 | 人（human) |
| 基因全称 | cholinergic receptor nicotinic alpha 7 subunit | 基因转录本 | NM_000746.6 |
| 基因别称 | nAChR7; NACHRA7; a7nAChR; | 表达蛋白 | NP_000737.1 |
| 基因ID | 1139 | 转录本长度 | 1506bp |
| 荧光表达 | 无 | 筛选标记 | Puro |
基因基本信息
人CHRNA7基因编码神经元烟碱型乙酰胆碱受体α7亚基（α7 nAChR），位于人类染色体15q13.2-q13.3区域，包含10个外显子，这一区域是多个神经精神疾病的遗传易感位点，包括精神分裂症、双相情感障碍、阿尔茨海默病和青少年肌阵挛癫痫，是中枢神经系统中最重要的离子通道型受体之一。
CHRNA7基因定位于染色体15q13.2-q13.3区域，全长约120 kb，包含10个外显子。α7 nAChR以同源五聚体形式存在，对钙离子具有高通透性，在认知功能、感觉门控、炎症调控和神经发育中发挥关键作用。该基因最独特的特征是在进化历程中发生了一次人类特异性的部分复制事件，形成了一个嵌合基因CHRFAM7A，该基因编码的dupα7蛋白可作为α7受体的显性负调节因子。CHRNA7的拷贝数变异和功能异常与多种神经精神疾病密切相关，包括精神分裂症、双相情感障碍、阿尔茨海默病、癫痫和15q13.3微缺失综合征。CHRNA7在神经发育、免疫调节和病毒感染中的功能不断被揭示，成为神经科学和临床医学交叉领域的重要研究靶点。
CHRNA7基因的组织结构遵循nAChR亚基基因的典型模式。每个亚基由四个跨膜结构域（TM1-TM4）组成，其中TM2形成离子通道的孔道内壁。具体而言，第1外显子编码N端胞外结构域的大部分序列，第2至第4外显子编码剩余胞外结构域和TM1，第5外显子编码胞内环（intracellular loop）的起始部分，第6至第9外显子编码TM3、TM4和部分胞内环，第10外显子编码C端短片段。
慢病毒感染快速指南
1.将目的细胞按30%汇合度接种到24孔板，约3-5×104细胞数/孔，不同细胞因为细胞大小不同细胞数量会不同，快速指南以细胞数量为5×104为例，加入500uL完全培养基进行细胞培养。
2.接种后12-20h感染阴性对照慢病毒（接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长，否则细胞增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选）。
3. 加病毒量计算方法：（细胞数×MOI值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量见下表。同时加入Polybrene，每孔加0.25uL，浓度为10mg/mL Polybrene，细胞培养液中终浓度为5ug/mL。
病毒液滴度（TU/mL） | MOI=10（uL） | MOI=20（uL） | MOI=40（uL） | MOI=80（uL） | MOI=100（uL） |
| 1×108TU/mL | 5uL | 10uL | 20uL | 40uL | 60ul |
4.感染16-20h后更换培养基，弃去培养基，每孔加入500uL新鲜的培养基。
5. 感染后48-96h显微镜观察荧光。（注：如果48h-96h期间细胞汇合度达到100%，请及时传代培养）。
6. 建议将48孔板细胞进行传代，传代12孔板，后继续观察荧光，根据细胞状态和荧光细胞比例综合判断细胞感染最佳MOI值。一般选择细胞生长良好，感染效率80%左右的感染条件作为最佳感染条件。（注：100%荧光感染不是细胞最佳MOI值，因为可能会造成细胞慢病毒感染拷贝数太高，影响细胞正常生长状态）。
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