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GC-Plenti-SFFV-NDRG2（human)-Flag-T2A-puro
过表达慢病毒产品信息
| 产品名称 | GC- Plenti-SFFV-NDRG2（human)-Flag-T2A-puro | ||
| 基因名称 | NDRG2 | 物种 | 人（human) |
| 基因全称 | NDRG family member 2 | 基因转录本 | NM_001282211.2 |
| 基因别称 | SYLD | 表达蛋白 | NP_001269140.1 |
| 基因ID | 57447 | 转录本长度 | 1076bp |
| 荧光表达 | 无 | 筛选标记 | Puro |
基因基本信息
NDRG2（N-myc下游调节基因2）是NDRG基因家族的重要成员，该家族在人类中包括四个成员：NDRG1、NDRG2、NDRG3和NDRG4。家族成员之间具有较高的同源性。NDRG2基因定位于人类染色体14q11.2，包含16至17个外显子，其中第1和第2个外显子为非编码区，编码一个含357个氨基酸、分子量约40 kDa的蛋白质，具有α/β水解酶折叠结构域特征。NDRG2在中枢神经系统中主要表达于星形胶质细胞，通过调控星形胶质细胞活化、炎症反应、谷氨酸兴奋性毒性及血脑屏障完整性等机制，广泛参与脑卒中、阿尔茨海默病、抑郁症等神经系统疾病的病理进程。在肿瘤生物学领域，NDRG2在胶质母细胞瘤、肝癌、胃癌、乳腺癌、小细胞肺癌等多种恶性肿瘤中表达显著下调，其抑癌功能主要通过作为蛋白磷酸酶2A（PP2A）的接头蛋白，调控PTEN-AKT-mTOR等关键信号通路来实现。NDRG2的表达受到MYC、SP1等转录因子的负向调控以及启动子区甲基化的表观遗传学调节。
慢病毒感染快速指南
1.将目的细胞按30%汇合度接种到24孔板，约3-5×104细胞数/孔，不同细胞因为细胞大小不同细胞数量会不同，快速指南以细胞数量为5×104为例，加入500uL完全培养基进行细胞培养。
2.接种后12-20h感染阴性对照慢病毒（接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长，否则细胞增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选）。
3. 加病毒量计算方法：（细胞数×MOI值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量见下表。同时加入Polybrene，每孔加0.25uL，浓度为10mg/mL Polybrene，细胞培养液中终浓度为5ug/mL。
病毒液滴度（TU/mL） | MOI=10（uL） | MOI=20（uL） | MOI=40（uL） | MOI=80（uL） | MOI=100（uL） |
| 1×108TU/mL | 5uL | 10uL | 20uL | 40uL | 60ul |
4.感染16-20h后更换培养基，弃去培养基，每孔加入500uL新鲜的培养基。
5. 感染后48-96h显微镜观察荧光。（注：如果48h-96h期间细胞汇合度达到100%，请及时传代培养）。
6. 建议将48孔板细胞进行传代，传代12孔板，后继续观察荧光，根据细胞状态和荧光细胞比例综合判断细胞感染最佳MOI值。一般选择细胞生长良好，感染效率80%左右的感染条件作为最佳感染条件。（注：100%荧光感染不是细胞最佳MOI值，因为可能会造成细胞慢病毒感染拷贝数太高，影响细胞正常生长状态）。
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