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GC-Plenti-SFFV-UQCR1（human)-Flag-P2A-Puro
过表达慢病毒产品信息
| 产品名称 | GC-Plenti-SFFV-UQCR1(human)-Flag-P2A-Puro | ||
| 基因名称 | UQCR1 | 物种 | 人（human) |
| 基因全称 | ubiquinol-cytochrome c reductase core protein 1 | 基因转录本 | NM_003365.3 |
| 基因别称 | QCR1, PKNPY, UQCR1, D3S3191 | 表达蛋白 | NP_003356.2 |
| 基因ID | 7384 | 转录本长度 | 1440bp |
| 荧光表达 | 无 | 筛选标记 | Puro |
基因基本信息
UQCRC1（泛醇-细胞色素c还原酶核心蛋白1，Ubiquinol-Cytochrome c Reductase Core Protein 1）基因编码线粒体呼吸链复合体III（细胞色素b-c1复合物）的核心蛋白亚基，是线粒体氧化磷酸化系统的重要组成部分。该基因定位于人类染色体3p21.31，包含13个外显子，编码一个属于肽酶M16家族但缺乏蛋白酶活性的线粒体蛋白。UQCRC1作为复合体III的11个亚基之一，参与催化电子从泛醇向细胞色素c的传递，并通过Q循环驱动质子跨膜转运，维持线粒体内膜的质子梯度。该蛋白可能还参与Rieske蛋白UQCRFS1的原位加工成熟。UQCRC1在心脏、肾脏、脑等能量需求高的组织中广泛表达。近年来的研究发现，UQCRC1基因突变（p.Ile311Leu和p.Tyr314Ser）与常染色体显性遗传的帕金森病伴多发性神经病（PKNPY）相关，但其与原发性线粒体疾病的关联目前存在争议。此外，UQCRC1在阿尔茨海默病中表达上调，被报道为潜在的生物标志物，在透明细胞肾细胞癌、骨肉瘤等肿瘤中亦呈现差异表达。UQCRC1参与帕金森病、阿尔茨海默病、亨廷顿病等多种神经退行性疾病相关通路，其功能异常与线粒体功能障碍密切相关。
慢病毒感染快速指南
1.将目的细胞按30%汇合度接种到24孔板，约3-5×104细胞数/孔，不同细胞因为细胞大小不同细胞数量会不同，快速指南以细胞数量为5×104为例，加入500uL完全培养基进行细胞培养。
2.接种后12-20h感染阴性对照慢病毒（接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长，否则细胞增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选）。
3. 加病毒量计算方法：（细胞数×MOI值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量见下表。同时加入Polybrene，每孔加0.25uL，浓度为10mg/mL Polybrene，细胞培养液中终浓度为5ug/mL。
病毒液滴度（TU/mL） | MOI=10（uL） | MOI=20（uL） | MOI=40（uL） | MOI=80（uL） | MOI=100（uL） |
| 1×108TU/mL | 5uL | 10uL | 20uL | 40uL | 60ul |
4.感染16-20h后更换培养基，弃去培养基，每孔加入500uL新鲜的培养基。
5. 感染后48-96h显微镜观察荧光。（注：如果48h-96h期间细胞汇合度达到100%，请及时传代培养）。
6. 建议将48孔板细胞进行传代，传代12孔板，后继续观察荧光，根据细胞状态和荧光细胞比例综合判断细胞感染最佳MOI值。一般选择细胞生长良好，感染效率80%左右的感染条件作为最佳感染条件。（注：100%荧光感染不是细胞最佳MOI值，因为可能会造成细胞慢病毒感染拷贝数太高，影响细胞正常生长状态）。
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