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GC-Plenti-SFFV-UQCR1（mouse)-Flag-P2A-Puro
过表达慢病毒产品信息
| 产品名称 | GC-Plenti-SFFV-Uqcrc1（mouse)-Flag-P2A-Puro | ||
| 基因名称 | Uqcrc1 | 物种 | 小鼠（Mouse) |
| 基因全称 | ubiquinol-cytochrome c reductase core protein 1 | 基因转录本 | NM_003366.3 |
| 基因别称 | 1110032G10Rik | 表达蛋白 | NP_079683.2 |
| 基因ID | 22273 | 转录本长度 | 1440bp |
| 荧光表达 | 无 | 筛选标记 | Puro |
基因基本信息
Uqcrc1（Ubiquinol-Cytochrome c Reductase Core Protein 1）是小鼠基因组中编码线粒体呼吸链复合物III（泛醌-细胞色素c还原酶）核心蛋白1的关键基因，定位于 9 号染色体，由13个外显子组成，该基因编码的蛋白质是复合物III的必需结构组分，对复合物的形成、稳定性和酶活性至关重要，蛋白主要定位于线粒体内膜。Uqcrc1纯合敲除导致早期胚胎致死，揭示了其不可或缺的生理功能。杂合子小鼠虽可存活，但表现出脑缺血耐受性降低、学习记忆障碍、心功能受损以及认知功能缺陷等多种表型。近年来，Uqcrc1在神经退行性疾病、缺血性损伤和代谢调控中的作用日益受到关注。
慢病毒感染快速指南
1.将目的细胞按30%汇合度接种到24孔板，约3-5×104细胞数/孔，不同细胞因为细胞大小不同细胞数量会不同，快速指南以细胞数量为5×104为例，加入500uL完全培养基进行细胞培养。
2.接种后12-20h感染阴性对照慢病毒（接种细胞至病毒感染细胞时间不宜太长，否则细胞增殖影响细胞密度不利用后期抗性筛选）。
3. 加病毒量计算方法：（细胞数×MOI值/病毒滴度）×103=病毒量（uL），加病毒量见下表。同时加入Polybrene，每孔加0.25uL，浓度为10mg/mL Polybrene，细胞培养液中终浓度为5ug/mL。
病毒液滴度（TU/mL） | MOI=10（uL） | MOI=20（uL） | MOI=40（uL） | MOI=80（uL） | MOI=100（uL） |
| 1×108TU/mL | 5uL | 10uL | 20uL | 40uL | 60ul |
4.感染16-20h后更换培养基，弃去培养基，每孔加入500uL新鲜的培养基。
5. 感染后48-96h显微镜观察荧光。（注：如果48h-96h期间细胞汇合度达到100%，请及时传代培养）。
6. 建议将48孔板细胞进行传代，传代12孔板，后继续观察荧光，根据细胞状态和荧光细胞比例综合判断细胞感染最佳MOI值。一般选择细胞生长良好，感染效率80%左右的感染条件作为最佳感染条件。（注：100%荧光感染不是细胞最佳MOI值，因为可能会造成细胞慢病毒感染拷贝数太高，影响细胞正常生长状态）。
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